TÉCNICAS INMUNOLÓGICAS (LAS MAS IMPORTANTES)

INTRODUCCIÓN:

Las técnicas inmunológicas son aquellas que se basan en la especificidad antígeno-anticuerpo. Como técnicas inmunológicas hay muchas pero dentro de las mas importantes estan clasificadas en dos grupos:

• Reacciones Ag-Ac in vivo.
• Reacciones Ag-Ac in vitro:

         

REACCIONES Ag-Ac IN VIVO.

      Las cuales se utilizan para medir la actividad inmunitaria, suelen ser utilizados en alergología, inmunología y en microbiología. Dentro de este tipo de técnica existen dos clases:

-La prueba de la Lepromina que en caso positivo pone de manifiesto el contacto con la bacteria productora de la lepra.

REACCIONES Ag-Ac IN VITRO.

REACCIONES DE PRECIPITACIÓN.

Este tipo de reacción Permite detectar la presencia y cantidad de antígenos y anticuerpos específicos, ya que detecta principalmente un Ac que es la IgG (Inmunoglobulina G). Este tipo de técnica se puede desarrollar en:

• Medio líquido, dentro del cual tenemos a su vez:

          -El Ring Test como técnica cuantitativa.

          -La nefelometría y floculación como técnicas cualitativas.

•  Medio sólido, dentro del cual tenemos a su vez:

           -Inmunodifusión radial o (IDR): Es una técnica que permite cuantificar de forma sencilla la presencia de inmunoglobulinas M,A y G, presentes en el suero de un individuo

           -Inmunoelectroforesis: es una técnica cualitativa que permite la identificación de diferentes compuestos proteicos presentes en muestras biológicas a través de arcos de precipitación, esta técnica se realiza preferentemente en geles de agarosa y en ella se diferencian dos etapas:

                1. La muestra se somete a una separación electroforética.

                2. Una vez realizada la separación, las proteínas interaccionan con los Ac específicos aplicados en el agar en un canal paralelo al eje de migración, posteriormente se empiezan a observar arcos de precipitación cuya forma y posición dependen de las características inmunoquímicas y de la concentración de cada proteína. 

•  técnicas in vivo inmediatas cuyo efecto se ve al poco tiempo de producir se la reacción.
• técnicas in vivo retardadas cuyo efecto se manifiesta al cabo del tiempo de producirse la reacción dentro de las cuales se encuentran:

           -El test de Mantoux también llamada prueba de la tuberculina que en caso positivo pone de manifiesto el contacto con la bacteria productora de la tuberculosis.

 REACCIONES DE AGLUTINACIÓN. Son útiles para la detección de antígenos y anticuerpos. Su fundamento es inducir una agrupación microscópicamente visible de partículas, causada por interacciones antígeno anticuerpo que forman puentes entre ellas.

        En este caso la interacción Ag-Ac da lugar a un precipitado en forma de grumos, la diferencia que existen entre ambas técnicas, precipitación y aglutinación, son debidas a las características del Ag, debido a que el Ag que se utiliza en las reacciones de precipitación es soluble mientras que en las reacciones de aglutinación el Ag es particulado, detecta principalmente Ig M ( aglutinante).

     Existen varios tipos de aglutinación en donde se destacan:

• Aglutinación directa donde se determina al Ag.
• Aglutinación indirecta donde se determina el Ac.
• Prueba de Coombs en el que los Ac que se busca no son aglutinantes como es el caso de la IgG.
• AGLUTINACION ACTIVA-: anticuerpos dirigidos contra componentes de las partículas
• AGLUTINACION PASIVA: los anticuerpos se dirigen contra moléculas que se han adherido intencionalmente a

una partícula que actúa como medio de soporte pasivo (látex).

Una variante es la aglutinación pasiva reversa, en donde lo que se detecta es el antígeno

y las partículas están recubiertas por el anticuerpo.

ENZIMOINMUNOANÁLISIS: ELISA.

 se basa e el uso de antígenos o anticuerpos marcados con una enzima, de forma que los conjugados resultantes tengan actividad tanto inmunológica como enzimática. Al estar uno de los componentes (antígeno o anticuerpo) marcado con una enzima e insolubilizado sobre un soporte (inmunoadsorbente) la reacción antígeno-anticuerpo quedará inmovilizada y, por tanto, será fácilmente revelada mediante la adición de un substrato especifico que al actuar la enzima producirá un color observable a simple vista o cuantificable mediante el uso de un espectrofotómetro o un colorímetro.

Los diferentes tipos de ELISA son los que se enumeran a continuación:

• Anticuerpos marcados:

�� ELISA Directo

�� ELISA Indirecto

�� ELISA sándwich

�� Doble (DAS)

�� Heterólogo (HADAS)

• Antígeno marcado

�� ELISA competitivo 

• Reacciones de neutralización: determina si la actividad de una toxina, virus o bacteria es capaz de ser neutralizada por un Ac.

• Reacciones de inmofluorescencia (IF), empleada para identificar anticuerpos o antígenos específicos.  en este caso utiliza Ac conjugados con fluorocromos las cuales son moléculas que al ser excitadas con la energía de una determinada longitud de onda son capaces de emitir energía de una longitud de onda mayor, dentro de esta técnica se tienen dos tipos:

              -IF directa, permite la detección de Ag

              -IF indirecta, permite la detección de Ac.

          

Radioinmunoanálisis (RIA): Esta técnica permite la cuantificación exacta de compuestos bajas como ng/ml (nanogramo) o incluso pg/ml (picogramo).bilógicos presentes en el organismo en concentraciones.

 

IMPORTANCIA DE  TIC"S
Las tecnologías de la información y la comunicación (TIC) son aquellas herramientas computacionales e informáticas que procesan, almacenan, sintetizan, recuperan y presentan información representada de la más variada forma. Es un conjunto de herramientas, soportes y canales para el tratamiento y acceso a la información. Para todo tipo de aplicaciones educativas, las TIC son medios y no fines. Es decir, son herramientas y materiales de construcción que facilitan el aprendizaje, el desarrollo de habilidades y distintas formas de aprender, estilos y ritmos de los aprendices. Son de gran importancia, ya que es de gran ayuda por ejemplo este blog es una herramienta de trabajo en la escuela, permite que publiquemos información de gran utilidad para nuestra especialidad y así contribuyamos a mejorar las investigaciones nuestras y de personas que lo utilicen y requieran. El uso de esto no solo es para nosotros si no también para personas que se interesen por los temas que aquí se exponen y enriquecer su conocimiento.

LINKS

http://www.investigalog.com/tecnicas_generales_de_analisis_microbiologicos/tema-8-tecnicas-inmunologicas/

http://mesa54dinmuno.blogspot.com/2009/05/tecnicas-inmunologicas.html

http://www.cultek.com/inf/otros/soluciones/Soluciones-ELISA-protocolos.pdf

http://www.youtube.com/watch?v=1oCbo808vQ4

http://www.youtube.com/watch?v=Jmrv137VQIA

http://www.youtube.com/watch?v=CaEwcf5ntWw&feature=related

http://www.youtube.com/watch?v=OH2GFeaGV6w&feature=related

http://www.youtube.com/watch?v=xEZew476-GI

 MESA 6
José Manuel Cadeza Aguilar
Alma Ruth Gutiérrez García.
Citlari Lariza Uscanga Hernández.
Frida Kerena Danglada Montes.
Ángela Daniela Echevarría Cruz.
Maite Lara Rodríguez.